EMR2在肝外胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究EMR2在肝外胆管细胞癌(extrahepatic cholangiocarcinoma,EHCC)中的表达及临床意义、生物学功能及机制.方法:采用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)实验检测EMR2在EHCC组织及癌旁组织中的表达情况,并分析EMR2表达与EHCC患者临床病理特征之间的关系.利用Kaplan-Meier方法、COX比例风险模型分析EMR2表达在EHCC患者预后中的作用以及对EHCC患者预后造成危险的因素.通过qRT-PCR和Western blot实验测定EMR2在EHCC细胞系(QBC939、SK-CHA-1、KMBC)和正常胆管上皮细胞HIBEpic中mRNA及蛋白的相对表达水平,检验细胞敲低和过表达的效率.Western blot实验检测EMR2在上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)中的表达变化.细胞侵袭、增殖、迁移能力分别用Transwell侵袭实验、CCK-8实验、细胞划痕及Tranwell迁移实验检测.结果:IHC结果显示,EMR2在癌旁组织中阳性表达率低于EHCC组织,EMR2的表达与EHCC分化程度有关.Kaplan-Meier生存曲线显示:EMR2的表达与EHCC患者的预后有相关性,EMR2表达和EHCC分化程度是影响EHCC患者预后的独立危险因素.通过qRT-PCR和Western blot实验确定了以EMR2高表达细胞株QBC 939和低表达细胞株KMBC作为后续实验对象,并且验证了转染效率.EMR2在EHCC细胞中的表达与细胞增殖、迁移、侵袭能力和N-cadherin、Vimentin蛋白水平成正比,与E-cadherin蛋白水平成反比.结论:EMR2表达与EHCC分化程度、预后有相关性,EMR2表达和分化程度是独立影响EHCC预后的因素.EMR2高表达能够促使EHCC细胞的增殖、侵袭、迁移能力增加,其机制可能与EMT有关.