育肥绵羊胃肠道乳酸菌的分离鉴定及部分体外益生特性评价

本研究旨在探寻益生特性优良、可作为抗生素替代品的羊源乳酸菌,为后续饲用益生菌的开发与利用提供依据.以育肥羊不同肠段和瘤胃内容物为菌株分离的来源,采用碳酸钙-MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,通过初筛、溶血试验复筛获取安全菌株,对安全菌株进行形态学、生化鉴定和16S rRNA测序鉴定,并评价其抑菌能力、抗生素敏感性和耐受性.结果显示:共获取12株同型乳酸菌——海氏肠球菌的安全菌株,分别来源于空肠(K1、K2、K3、K4)、回肠(H1、H2、H3、H4、H5、H6)、直肠(Z1)和瘤胃(L1).在抑菌能力方面,12株海氏肠球菌对2种典型致病菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均具有一定的抑制性,且对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径极大于大肠杆菌,对这2种指示菌的抑菌圈直径分别为7.30～12.30 mm(平均为9.90 mm)和6.90～9.47 mm(平均为8.43 mm),尤其是来自空肠的K2菌株对这2种指示菌的抑菌圈最大;从抗生素敏感性分析,K2和H5菌株具广泛的抗生素敏感性,对6种抗生素敏感,其余菌株(L1除外)对5种抗生素敏感;从耐受性上看,这12株海氏肠球菌对胃肠液均具有一定的耐受性,L1和K2菌株在胃液中存活率较高,分别达175.61％和173.72％,极显著高于其他菌株(P<0.01),K2菌株在肠液中存活率最高,达到143.68％,极显著高于其他菌株(P<0.01);另外,从细菌生长规律可以看出,这12株海氏肠球菌的生长对数期均为2～14 h.综上可知,本试验筛选出的12株海氏肠球菌抑菌能力强、具有一定抗生素敏感性且能耐受胃肠液,尤其是分离自空肠的K2菌株,可为饲用益生菌剂的开发提供参考菌种.