疏肝健脾方调控TLR4/My D88/N LRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的:基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制.方法:采用四氯化碳(CCl 4)与橄榄油混合液背部皮下注射的方法,复制化学性肝纤维化小鼠模型.造模首日,灌胃给予疏肝健脾方,每天1次,连续12周;HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度,透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况;RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况.结果:病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊,肝细胞索排列紊乱,胶原沉积增加,焦亡小体数量明显增加,肝组织中α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高.与模型组相比,疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度,抑制细胞焦亡,显著下调α-SMA、CollagenⅠ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平.结论:疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴,减少细胞焦亡,抑制肝星状细胞活化有关.