豆甾醇通过抑制钙离子内流抑制大鼠前列腺间质细胞收缩

[目的]检测豆甾醇对前列腺间质细胞收缩的抑制作用.[方法]体外培养大鼠原代前列腺间质细胞,通过鬼笔环肽染色法对前列腺间质细胞进行表型鉴定;用细胞增殖及乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测豆甾醇对前列腺间质细胞活力和毒性的影响;用胶原凝胶收缩实验检测对前列腺间质细胞收缩功能的影响;运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法研究豆甾醇对收缩相关的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)的mRNA水平表达的影响;用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测豆甾醇对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的α-SMA表达的影响;流式细胞术检测豆甾醇对乙酰胆碱(ACh)诱导的细胞内钙离子浓度的影响.[结果]大鼠原代前列腺细胞培养获得的细胞以间质平滑肌细胞为主;浓度低于10μmol/L的豆甾醇对前列腺间质细胞的活力无明显影响,且无明显毒性;胶原凝胶实验结果显示,血清可以使前列腺间质细胞收缩,差异具有统计学意义(P<0.01),10μmol/L的豆甾醇可显著抑制该收缩作用,抑制率可达到77.1％,差异具有统计学意义(P<0.05);RT-PCR结果显示,豆甾醇显著降低大鼠前列腺间质细胞中α-SMA和CollagenⅠmRNA水平的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);Western Blot结果显示,豆甾醇可以抑制TGF-β1诱导的α-SMA蛋白的表达;流式细胞实验发现ACh刺激导致的钙离子浓度明显增加可以被豆甾醇显著抑制.[结论]豆甾醇可抑制前列腺间质收缩,其机制与抑制其钙离子内流有关.