泛素调控蛋白A20对慢性乙肝患者单核细胞活性的影响

目的:观察泛素调控蛋白A20在慢性乙肝患者外周血中的变化及其对CD14+单核细胞功能的影响.方法:选取慢性乙肝患者47例和健康对照者26例,纯化外周血CD14+单核细胞和CD4+T细胞,流式细胞术检测CD14+单核细胞中A20水平,实时定量PCR检测CD14+单核细胞中A20mRNA相对表达量.A20 siRNA或对照siRNA转染慢性乙肝患者纯化的CD14+单核细胞,ELISA检测上清中炎症细胞因子水平,实时定量PCR检测FasL和TRAIL mRNA相对表达量.CD14+单核细胞与HepG2.2.15细胞共培养,检测CD14+单核细胞诱导靶细胞死亡的比例.CD14+单核细胞与CD4+T细胞共培养,流式细胞术检测CD4+T细胞分泌IFN-γ和IL-17的比例.结果:慢性乙肝患者外周血CD14+单核细胞中A20+细胞比例高于健康对照者(P=0.0004),慢性乙肝患者外周血CD14+单核细胞中A20平均荧光强度和A20mRNA相对表达量亦高于健康对照者(P＜0.001).A20 siRNA转染慢性乙型肝炎患者纯化的CD14+单核细胞后,分泌炎症细胞因子水平高于未转染细胞和对照siRNA转染细胞(P＜0.05),但FasL和TRAIL mRNA未见明显变化(P＞0.05).A20 siRNA转染的CD14+单核细胞诱导靶细胞死亡的比例高于未转染细胞和对照siRNA转染细胞(P＜0.05),诱导CD4+T细胞分泌IFN-γ和IL-17的比例亦高于未转染细胞和对照siRNA转染细胞(P＜0.05).结论:慢性乙肝患者CD14+单核细胞中高表达的A20有抑制细胞毒性及CD4+T细胞活化的作用,可能与导致乙型肝炎病毒感染慢性化相关.