BMP-2、TGF-β1、干扰素γ参与人牙髓干细胞增殖及成骨向分化的机制探究

目的 探究人骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、干扰素 γ(IFN-γ)参与人牙髓干细胞增殖及成骨向分化的机制.方法 选取因阻生或正畸减数拔除的健康恒牙,经组织块酶消化法分离并提取牙髓干细胞进行原代培养,光镜观察形态学变化,取对数生长期人牙髓干细胞,加入不同浓度BMP-2(50 ng/mL、100 ng/mL、150 ng/mL)、TGF-β1(1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)、IFN-γ(50 U/mL、100 U/mL、200 U/mL),同时设置阴性对照组,分别在第1 d、3 d、7 d检测细胞增殖情况(OD值),第7 d、14 d检测成骨向分化指标[碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)]表达情况,Spearman分析BMP-2、TGF-β1、IFN-γ与OD值、成骨向分化指标相关性.结果(1)当BMP-2、TGF-β1、IFN-γ浓度分别为100 ng/mL、5 ng/mL、200 U/mL时,OD值达到峰值;(2)第7 d联合组OD值高于对照组(P<0.05);(3)第7 d、14 d BMP-2组、TGF-β1组、IFN-γ组、联合组ALP、COL-Ⅰ水平高于对照组(P<0.05);⑷Spearman分析得知,BMP-2、TGF-β1、IFN-γ与OD值、ALP、COL-Ⅰ呈正相关(P<0.05).结论 BMP-2、TGF-β1、IFN-γ联合能显著促进人牙髓干细胞增殖及成骨向分化,对牙髓及牙周膜等纤维结缔组织的再生具有一定理论意义.