重复经颅磁刺激上调DJ-1表达改善小鼠创伤性脑损伤后功能障碍的研究

目的:探讨重复经颅磁刺激（rTMS）对小鼠创伤性脑损伤（TBI）模型的神经功能障碍恢复及DJ-1表达的影响。方法:8~12周健康雄性C57BL/6J小鼠30只，采用随机数字表法分为Sham组（假手术组）、TBI组及rTMS组，每组10只。Sham组只开骨窗，不打击脑皮质；TBI组和rTMS组应用控制性皮层冲击损伤（CCI）模型，采用固定打击速度（3 m/s）、停留时间（200 ms）及打击深度（3.0 mm）的方法进行模型制备。模型制备后24 h对Sham组和rTMS组给予rTMS治疗（频率为1 Hz，每次持续25 s，5次/d，连续治疗14 d），TBI组治疗时放入关闭的线圈内。分别在治疗前后对小鼠进行神经功能缺损评分和行为学实验。治疗14 d后，采用苏木素-伊红（HE）染色观察组织病理学改变；采用免疫组织化学技术检测创伤灶周围区域神经元中DJ-1表达变化；采用TUNEL染色检测创伤区域细胞凋亡情况；采用Western blot检测DJ-1的蛋白水平表达变化。结果:创伤后7、14 d，TBI组和rTMS组的mNSS评分均显著高于Sham组，且rTMS组的mNSS评分低于TBI组，差异均具有统计学意义（P<0.05）。rTMS组的mNSS评分在创伤后14 d已降低至6分以下。行为学实验中，平衡木实验结果显示创伤后小鼠通过平衡木的时间显著增加，随着时间延长小鼠运动功能逐渐恢复，rTMS组小鼠通过平衡木的时间相较于TBI组明显缩短，差异均具有统计学意义（P<0.05）；转棒实验结果显示创伤后小鼠在转棒上停留的时间明显减少，随着时间延长停留时间逐渐增加，但rTMS组小鼠停留的时间明显多于TBI组，差异均具有统计学意义（P<0.05）。TBI模型小鼠脑组织病理学显示，脑创伤区域损伤明显，损伤灶局限并逐渐修复。与Sham组和TBI组相比，rTMS组DJ-1表达量显著增加，差异有统计学意义（P<0.05）。结论:rTMS可有效促进TBI小鼠神经功能的恢复和创伤灶的恢复，可能是由于rTMS促进了机体DJ-1的表达，使得神经功能缺损评分降低以及创伤面积减小。