Elafibranor对原代增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨elafibranor对原代增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblast,HSFB)增殖的抑制作用及可能机制.方法 取瘢痕切除术患者新鲜瘢痕组织标本,提取HSFB细胞培养至对数生长期,采用MTT实验检测0、5、10、15、20、30、40 μmol/L elafibranor处理48 h时细胞增殖率,筛选适宜elafibranor浓度进行后续实验.对数生长期HSFB细胞分为空白组、低浓度组、高浓度组,分别用0、5、15 μmol/L elafibranor处理,采用MTT实验检测处理24、48、72、96、120 h时细胞增殖率.处理48 h时采用流式细胞术检测细胞周期,化学显色法检测氧化应激指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)水平.结果 随elafibranor浓度增加,HSFB细胞增殖率逐渐降低,其中15 μmol/L最接近半数抑制浓度,选择5、15 μmol/L进行后续实验.处理24、48、72、96、120 h时高浓度组、低浓度组细胞增殖率均低于空白组(P＜0.05),高浓度组均低于低浓度组(P＜0.05);3组细胞增殖率均随时间延长而增高(P＜0.05).处理48 h时高浓度组、低浓度组细胞G0/G1期比率[(66.4±0.3)％、(65.2±1.4)％]、MDA水平[(213.7±18.3)％、(126.3±10.2)％]均高于空白组[(61.2±0.4)％、(100.0±3.6)％](P＜0.05),G2 期比率[(20.1±0.2)％、(21.3±0.7)％]及 CAT[(58.6±8.6)％、(74.9±10.9)％]、GSH-Px[(47.6±8.8)％、(70.9±6.9)％]、T-SOD[(76.7±6.0)％、(92.4±2.6)％]水平均低于空白组[(24.5±0.4)％,(100.0±14.2)％、(100.0±5.5)％、(100.0±1.9)％](P＜0.05);高浓度组细胞G2期比率及CAT、GSH-Px、T-SOD水平均低于低浓度组(P＜0.05),MDA水平高于低浓度组(P＜0.05),G0/G1期比率与低浓度组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论Elafibranor可有效抑制HSFB细胞增殖,诱导细胞周期阻滞于G0/G1期,且呈剂量依赖性,作用机制可能与促进细胞内氧化应激有关.