大鼠肝彗星试验与骨髓微核试验评价结果比较研究

目的 梳理国家药物安全评价监测中心联合开展的大鼠多终点体内遗传毒性试验数据,比较大鼠肝彗星试验与骨髓微核试验结果的一致性和灵敏性.方法 试验分设阴性物质组、作用机制明确的遗传毒性阳性物质组、受试物组,阴性物质包括超纯水、0.9％氯化钠注射液、玉米油、0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、5％蔗糖和聚山梨酯80,给药体积为10 mL·kg-1;遗传毒性阳性物质包括200mg·kg-1甲磺酸乙酯(EMS)、40mg·kg-1N-乙基-N-亚硝基脲(ENU)、40mg·kg-1环磷酰胺、75 mg·kg-1甲基苄肼、800 mg·kg-1尿烷、75 mg·kg-1对氯苯胺、40 mg kg-1 1,2-二溴-3-氯丙烷和10 mg·kg-1秋水仙素;受试物包括100、300、1 000mg·kg-1大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,6.5、65.0、650.0mg·kg-1单蒽酮和6.5、65.0、650.0mg·kg-1大黄素甲醚.分别在实验0、24、45 h ig给药1次,给药体积为10 mL kg-1.开展大鼠肝彗星试验和骨髓微核试验,计算每只动物的肝细胞刺猬细胞率和尾DNA百分含量(Tail％DNA),以及每只动物的嗜多染红细胞(PCE)/总红细胞(ERY)比例和嗜多染红细胞微核(MNPCE)率.结果 大鼠肝彗星试验可有效检出DNA断裂剂,对多种烷化剂(甲磺酸乙酯、甲基苄肼和尿烷等)有较好的预测性,但对环磷酰胺和多倍体诱导剂不灵敏.大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、单蒽酮和大黄素甲醚骨髓微核试验结果均为阴性.大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷在1 000mg·kg-1剂量下导致的肝Tail％DNA与0.5％CMC-Na组比较显著升高(P＜0.05);单蒽酮的肝彗星试验结果为明确阳性,剂量为650 mg·kg-1时,单蒽酮可导致大鼠肝Tail％DNA显著升高(P＜0.05),且作用存在剂量相关性;大黄素甲醚的肝彗星试验结果为阴性.结论 大鼠肝彗星试验可与骨髓微核试验互补,有效检出主要作用于肝脏且亲电子性较强的遗传毒性化合物.