miR-124对牙髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制探讨

目的:观察微小RNA(miR)-124对牙髓间充质干细胞(DPSCs)成骨分化的影响,并探讨其可能机制.方法:取对数期DPSCs,分为空白组、空载组、miR-124 inhibitor组和miR-124 inhibitor联合氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(DAPT,Notch信号通路抑制剂]组.空白组不处理,空载组转染阴性对照载体inhibitor-NC,miR-124 inhibitor组转染miR-124 inhibitor,miR-124 inhibitor联合DAPT组转染miR-124 inhibitor,并加入DAPT使其终浓度为5μmol/L.转染48 h后,采用CCK-8法检测增殖能力;经诱导液诱导2周后,采用对-硝基苯磷酸盐(P-NPP)法检测碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色法检测钙化结节面积;Western印迹法检测细胞中发状分裂相关增强子1(HEY1)、发状分裂相关增强子2(HEY2)和细胞周期蛋白D1基因(CCND1)蛋白表达量.采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析.结果:与空白组、空载组相比,miR-124 inhibitor组CCK-824、48、72 h A450值,ALP活性A450值,钙化结节面积构成比和HEY1、HEY2、CCND1蛋白表达量显著升高(P<0.05);与miR-124 inhibitor组相比,miR-124 inhibitor联合DAPT组CCK-824、48、72 h A450值、ALP活性A450值、钙化结节面积构成比和HEY1、HEY2、CCND1蛋白表达量显著降低(P<0.05).结论:下调miR-124可促进DPSCs成骨分化,推测其作用机制与激活Notch信号通路有关.