针刺通过α7 nAChR/NF-κBp65信号通路减轻干眼眼表炎性反应

目的:观察电针对干眼豚鼠眼表炎性反应及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)/核因子κB(NF-κB)p65信号通路的影响,探讨电针治疗干眼的作用机制.方法:32只雄性英国三色短毛豚鼠随机分为空白组、模型组、电针组和假针刺组,每组8只.皮下注射氢溴酸东莨菪碱诱导干眼模型.电针组电针"攒竹""太阳"及手针针刺双侧"睛明""丝竹空""瞳子髎",15 min/次,1次/d,干预14 d;假针刺组采用钝针点刺穴位表面,取穴及时间同电针组,干预14 d.检测各组豚鼠造模前、造模后和干预后的泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌量(PRT)及角膜荧光素染色评分(Fl)等干眼相关眼表指标;用角膜共聚焦显微镜检测角膜上皮基质细胞周围活化免疫细胞密度;ELISA法检测角膜和泪腺中白细胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量,免疫组织化学法及Western blot法检测角膜及泪腺中α7nAChR、NF-κB p65表达水平.结果:与空白组比较,模型组豚鼠BUT及PRT均明显减少(P<0.01),Fl、角膜上皮细胞周围活化的免疫细胞数密度明显升高(P<0.01),角膜及泪腺中IL-6、IL-10、TNF-α含量及泪腺中NF-κB p65阳性表达明显升高(P<0.01,P<0.05),泪腺中α7nAChR阳性表达明显降低(P<0.01),角膜中NF-κB p65核蛋白表达明显升高(P<0.01).与模型组比较,干预后电针组BUT及PRT明显增加(P<0.01),Fl、角膜上皮中活化的免疫细胞密度降低(P<0.01,P<0.05),角膜及泪腺中IL-6、TNF-α含量降低(P<0.01),角膜及泪腺中IL-10含量及α7nAChR阳性表达及蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05),NF-κB p65阳性表达及NF-κB p65核蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05);假针刺组角膜中IL-10含量升高(P<0.01),角膜中TNF-α含量降低(P<0.05),泪腺中NF-κB p65阳性表达降低(P<0.01),泪腺中α7nAChR蛋白表达明显升高(P<0.01),角膜NF-κB p65核蛋白表达升高(P<0.05).与假针刺组比较,电针组的BUT及PRT增加(P<0.05,P<0.01),Fl明显降低(P<0.01),角膜及泪腺中IL-4、IL-10升高(P<0.05,P<0.01),IL-6、TNF-α明显降低(P<0.01),角膜及泪腺中α7nAChR阳性表达明显升高(P<0.01),角膜中NF-κB p65阳性表达明显降低(P<0.01),角膜及泪腺中α7nAChR蛋白表达升高(P<0.05),角膜及泪腺中NF-κB p65核蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05).结论:电针可上调α7 nAChR的表达,抑制NF-κB核转位,降低角膜活化的免疫细胞,减轻角膜及泪腺的炎性反应,改善干眼相关眼表指标.