香梨黑斑病病原菌分离及拮抗菌筛选鉴定

[目的]从香梨树体中筛选出对香梨采后黑斑病病原菌具有拮抗作用的内生菌,为香梨采后生物保鲜奠定基础.[方法]采用组织分离法,对香梨采后黑斑病病原菌及梨树内生菌进行分离,采用ITS基因与16S rRNA基因引物分别对分离出的病原菌和拮抗菌进行测序,采用平板对峙法测定内生菌的拮抗效果,并对拮抗效果优良的拮抗菌采用离体果实进行防效测定.[结果]分离得到香梨采后黑斑病病害病原菌1株,鉴定为Alternatia alternata XL2.从梨树叶片及枝条中分离出内生菌16株,其中8株对Alternatia alternata XL2有抑制作用,8 株拮抗菌均为芽孢杆菌属,分别为 Bacillus velezensis 5 株、Bacillus paralicheniformis、Bacillus siamensis和Bacillus tequilensis各1株,牛津杯琼脂扩散实验中Bacillus velezensis NY2、NY7抑菌效果最佳,其次为NY15,抑菌圈直径均可达20 mm以上.离体果实抑菌实验中短期效果最佳的为NY2,使用第4 d时抑菌率可达80％以上,中长期效果较佳的为NY11,使用第7 d天时仍可达20％以上.[结论]筛选获得2株优良的香梨采后黑斑病拮抗菌.