晚期日本血吸虫感染小鼠焦虑样行为学研究

目的 为观察晚期日本血吸虫感染(简称晚血)小鼠的行为学特征,探讨晚期血吸虫病与焦虑症程度的关系.方法 取30只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为2组:感染组小鼠(16只)经腹壁皮肤接触感染雌雄尾蚴20条/鼠,未感染组(14只)用不含尾蚴的去氯水处理,两组小鼠于感染后第8周灌服吡喹酮(300mg/kg).另设7只6周龄雄性APP/PS1双转基因小鼠(阿尔兹海默症模型小鼠)为阳性对照(转基因组),不作任何处理.3组小鼠于相同环境饲养至10月龄,观察各组小鼠在旷场试验(OFT)和高架十字迷宫试验(EPM)中的行为变化,以OFT的总路程、中央区路程、中央路程百分比、活动次数、活动时间、中央时间百分比、平均速度、中央平均速度和EPM中的开臂、闭臂和中央区的运动路程、停留时间和进入次数以及开臂内运动路程、停留时间和进入次数的百分比,评价各组小鼠的焦虑样行为.各组小鼠安乐死后,取肝脏,观察肝脏大体形态;肝组织切片经HE和Masson染色后,镜下观察肝脏病理变化和胶原纤维增生情况;测定肝脏胶原纤维特有的羟脯氨酸含量;应用荧光定量PCR检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、I型胶原(Col Ⅰ)、Col Ⅲ mRNA相对转录水平.应用SPSS 21.0软件进行统计学分析.结果 与未感染组比较,感染组小鼠肝脏颜色发暗,肝组织内有大量虫卵沉积,周围有炎性细胞浸润和胶原纤维增生.感染组小鼠的肝脏羟脯氨酸含量为(0.194±0.040)μg/mg,高于未感染组的(0.122±0.016)μg/mg和转基因组的(0.124±0.004)μg/mg(t=0.79、0.86,均P＜0.05).感染组小鼠肝脏 ColI、ot-SMA、TGF-β1、Col Ⅲ mRNA 相对转录水平分别为3.55±1.76、2.01±0.66、2.21 土 0.64、4.51±2.32,与未感染组比较差异无统计学意义(t=0.76、0.59、0.17、0.40,均P＞0.05).感染组小鼠OFT中的活动时间(346.77±181.03)s和EPM中的开臂内运动路程(206.31±282.52)mm、开臂内运动路程百分比(7.51±9.90)％,以及开臂、闭臂和中央进入次数(1.32±1.51)次、(3.44±3.10)次、(4.53±4.21)次均高于未感染组(t=1.61、2.24、1.66、1.83、2.35、2.22,P＜0.05或P＜0.01),两组小鼠的其他指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).感染组小鼠OFT中的活动次数为(123.68±50.23)次,少于转基因组的(147.90±41.17)次(t=-1.92,P＜0.05),其他OFT指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05);感染组小鼠EPM中的闭臂内停留时间为(232.85±88.82)s,短于转基因组的(295.38±9.88)s(t=-2.81,P＜0.01),其他EPM指标均高于转基因组(P＜0.05或P＜0.01).结论 晚血小鼠未表现出比未感染组小鼠更严重的焦虑水平,相反呈现出焦虑程度显著减轻的趋势,提示日本血吸虫感染的病理过程可能与焦虑症发生发展无直接相关.