小鼠急性肾损伤致远端肺凋亡和程序性坏死的时程变化

目的 探索小鼠急性肾损伤致远端肺损伤过程中,肺部细胞凋亡和程序性坏死随时间的变化规律.方法 30只8周龄雄性C57BL/6J小鼠(体质量20～22 g)按照随机数字表法平均分为6组(n=5):假手术(Shamm)组,行开腹关腹手术;肾缺血再灌注(RI/r)6、12、24、36、48 h1组,双肾夹闭缺血50 m11in后,再分别灌注6、12、24、36、48 ho HE染色评估肺组织损伤;专用试剂盒测定血清中肌酐(creatinine,Cr)及尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)浓度;TUNEL检测肺细胞凋亡;免疫荧光染色检测磷酸化混合系列蛋 白激酶样结构域蛋白(phosphorylation mixed lineage kinase domain like protein,p-MLKL);Western Blot 检测磷酸化受体相互作用蛋白激酶 1(phosphorylation receptor-interacting protein 1,p-RIP1)、p-MLKL和cleaved Caspase-3.结果 肾缺血再灌注后24 h内,小鼠血清Cr、BUN水平与肺组织HE染色病理损伤评分随时间延长逐渐升高,肾功能损伤程度与肺损伤程度呈正相关;肺组织凋亡阳性细胞和cleaved Caspase-3表达水平随时间延长逐渐增多.与Sham组比较,RI/r12、24、36、48 h组小鼠肺组织凋亡细胞显著增多(P＜0.05),RI/r24、36、48 h组cleaved Caspase-3表达水平显著增高(P＜0.05);p-MLKL和p-RIP1表达随时间延长逐渐增多,再灌注36 h时p-MLKL达到峰值之后下降.结论 肾缺血再灌注48 h内,肺损伤逐渐加重,肺细胞凋亡持续增加,程序性坏死于36 h达峰后减少.