鳖甲煎改良方下调CTGF/Itgα5对肝星状细胞T6周期变化、细胞凋亡及Col1a1表达的影响

目的 探讨鳖甲煎改良方(novel turtle shell decoction,NTSD)对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSCT6)的周期、凋亡、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)/整合素α5(integrin alpha5,Itgα5)通路及1型胶原(Collagen type 1,Col1a1)表达的影响.方法 以NTSD(含生药量为0.71g/mL)处理的HSCT6为实验(NTSD)组,鳖甲煎丸(turtle shell pills,TSP,与NTSD相同剂量)处理的HSCT6作为阳性对照(TSP)组,未处理的HSCT6为正常对照组.采用流式仪(FCM)检测各组HSCT6细胞的周期、凋亡变化.定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学技术分别检测各组HSCT6细胞的CTGF、Itgα5及Col1a1的mRNA及其蛋白的表达.结果 FCM检测结果显示,NTSD可将HSCT6阻滞于S细胞周期,并诱导其凋亡.定量PCR、Western blotting及免疫荧光细胞化学技术检测结果显示,NTSD可在mRNA与蛋白水平显著下调HSCT6的CTGF、Itgα5及Col1a1的表达,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 NTSD可通过下调CTGF/Itgα5将HSCT6阻滞于S细胞周期,诱导其凋亡,并影响其Col1a1的表达,以抑制其生长.