巴西苏木素对骨关节炎模型中软骨保护作用及内质网应激通路变化的实验研究

目的 研究巴西苏木素(Brazilin)对IL-1β诱导的骨关节炎(OA)细胞模型中的软骨细胞保护作用及内质网应激通路(ERS)的变化.方法 甲苯胺蓝对软骨细胞进行鉴定,CCK8检测Brazilin对正常软骨细胞增殖的影响;实验分组为正常软骨细胞组(Control组),其余组均用IL-1β(10 ng/mL)处理48 h建立OA体外模型,分为模型组(IL-1β组)、Brazilin低剂量组、Brazilin中剂量组、Brazilin高剂量组.显微镜拍照观察各组细胞形态变化,qRT-PCR和Western blot分别检测GRP78、CHOP、Collagen TjpeⅡ、MMP-13的基因和蛋白的表达.结果 本实验获得纯度较高的大鼠乳鼠原代软骨细胞;Brazilin在小于10μg/mL的浓度对细胞的增殖无影响;IL-1β诱导的OA模型中,IL-1β组较多细胞发生皱缩、染色质固缩、细胞质和细胞核裂解碎片现象,提示细胞凋亡的发生,Brazilin可以降低IL-1β诱导的凋亡发生,且成剂量依赖;MMP-13的表达上调,Collagen TjpeⅡ的表达下调,导致了软骨细胞的损伤,Brazilin处理后有效地逆转了相关因子的表达和激活(P均<0.05);IL-1β组ERS通路标志分子GRP78表达水平下调、CHOP表达水平上调,提示IL-1β诱导的软骨损伤机制可能与ERS通路有关,而Brazilin处理后通过促进GRP78的表达,抑制CHOP的表达,在软骨细胞修复中发挥作用(P均<0.05).结论 Bra-zilin改善IL-1β诱导的骨关节炎细胞模型中软骨损伤,其机制可能与激活ERS通路有关.