桑皮苷A对人肺癌细胞A549紫杉醇化疗的增敏作用及其机制研究

目的 研究桑皮苷A(Mul A)对人肺癌细胞A549紫杉醇(Taxol)化疗作用的影响及机制.方法 将A549细胞分为溶媒对照组(二甲基亚砜)、紫杉醇单用组(50 nmol·L-1紫杉醇处理48 h)、桑皮苷A组(10、20、40μmol·L-1桑皮苷A处理48 h)、紫杉醇联用桑皮苷A组(50 nmol·L-1紫杉醇+10、20、40μmol·L-1桑皮苷A处理48 h).用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测药物对细胞凋亡和细胞周期分布变化的影响;分别用聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹(Western blot)法检测桑皮苷A对A549细胞中P-糖蛋白(P-gp)mRNA表达、蛋白表达及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白的影响.结果 桑皮苷A可显著增强紫杉醇对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用,其中20,40μmol·L-1桑皮苷A与紫杉醇联用可分别使细胞存活率显著下降约17.28％和27.38％.同时,与紫杉醇单用相比,10、20、40μmol·L-1桑皮苷A与紫杉醇联用可使G2/M期细胞量占比分别显著增加0.73、1.54和2.82倍;此外,20、40μmol·L-1桑皮苷A与紫杉醇联用使G0/G1期细胞量占比分别显著减少26.74％和50.27％.细胞凋亡实验结果显示,桑皮苷A可明显增强紫杉醇诱导的A549细胞凋亡.与对照组相比,桑皮苷A可降低A549细胞内P-gp的mRNA和蛋白表达水平,10、20与40μmol·L-1可分别使P-gp mRNA表达水平显著下降26.76％、41.43％和62.30％.此外,研究还发现桑皮苷A显著性增强A549细胞内转录因子p65(RelA/p65)的核转位、升高细胞质中磷酸化核因子-kappa B抑制蛋白 α(p-IκBα)蛋白水平.结论 桑皮苷A对人肺癌细胞A549进行紫杉醇化疗具有增敏作用,其机制可能与激活细胞内NF-κB信号通路,进而下调P-gp的表达水平有关.