M2型小胶质细胞源性外泌体与小鼠神经元氧糖剥夺/复糖复氧损伤的关系

Chinese Journal of Anesthesiology(2022)

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摘要
目的:评价M2型小胶质细胞源性外泌体(M2-exo)与小鼠神经元氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤的关系。方法:体外培养小鼠神经母细胞(N2a细胞)及BV2小胶质细胞,采用20 ng/ml IL-4将BV2小胶质细胞激活为M2型,提取M0型小胶质细胞源性外泌体(M0-exo)和M2-exo。采用随机数字表法将N2a细胞分为4组( n=23):对照+M0-exo组(C+M0组)、对照+M2-exo组(C+M2组)、OGD/R+M0-exo组(O+M0组)和OGD/R+M2-exo组(O+M2组)。C+M0组和C+M2组分别加入M0-exo和M2-exo(终浓度100 μg/ml)孵育24 h,O+M0组和O+M2组于氧糖剥夺3 h时分别加入M0-exo和M2-exo(终浓度100 μg/ml),再复糖复氧24 h。采用CCK-8法检测N2a细胞活力,采用LDH释放率评估细胞损伤程度,采用Western blot法及实时q-PCR检测Bax和Bcl-2及其mRNA表达。 结果:与C+M0组比较,C+M2组N2a细胞活力、LDH释放率、Bax/Bcl-2比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值差异无统计学意义( P>0.05),O+M0组N2a细胞活力下降,LDH释放率、Bax/Bcl-2比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值升高( P<0.05)。与C+M2组比较,O+M2组N2a细胞活力下降,LDH释放率、Bax/Bcl-2比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值升高( P<0.05)。与O+M0组比较,O+M2组N2a细胞活力升高,LDH释放率、Bax/Bcl-2比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值降低( P<0.05)。 结论:M2-exo在小鼠神经元OGD/R过程中发挥内源性保护作用,可能与抑制细胞凋亡有关。
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关键词
Microglia,Exosomes,Neurons,Reperfusion injury
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