多精受精中人卵丘颗粒细胞差异基因表达分析

目的 筛选人卵丘颗粒细胞中影响卵母细胞多精受精的差异表达基因.方法 筛选3名因输卵管因素导致继发不孕的患者为研究对象,长方案促排卵后,在授精前10 min,对每个卵母细胞外围的卵丘颗粒细胞进行切割,分装无菌管保存.卵冠丘复合体(OCCC)进行微滴授精,受精后17～18 h,观察受精情况;并根据卵母细胞受精情况分为多精受精组和正常受精组,收集两组对应的颗粒细胞.提取颗粒细胞总mRNA,构建cDNA文库并进行测序,将得到的数据进行生物信息学分析,筛选出差异表达基因,并将差异表达基因进行基因本体论(GO)分析和京都基因和基因组数据库(KEGG)分析.结果 与正常受精组比较,多精受精组中显著上调的基因有106个,显著下调的基因有33个.上调的基因主要涉及P53信号通路、PI3K-AKT信号通路、肌动蛋白细胞骨架信号通路和HIPPO信号通路,其中基因BMP2、SESN3、CDK6、GRLF1(ARHGAP35)与多精受精有关.结论 与正常受精比较,多精受精时颗粒细胞存在差异表达的基因,对这些基因的进一步了解可能为后续开展异常受精的影响因素分析提供一定参考.