Brahma相关基因-1调控乏氧诱导因子-1α参与结直肠癌血管生成

目的 观察交配型转换/蔗糖不发酵(SWI/SNF)复合体调节亚基Brahma相关基因-1(Brg-1)对结直肠癌血管生成的影响.方法 对结肠癌细胞系LoVo细胞感染sh-Brg-1慢病毒(Lenti-sh-Brg-1组)和对照病毒(Lenti-con组),通过蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测常氧及乏氧状态下乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)的蛋白和mRNA水平的变化,运用体外微管形成实验观察低表达Brg-1对结直肠癌血管形成的影响,组间比较采用t检验.结果 Western blot结果证明,与Lenti-con组比较,Lenti-sh-Brg-1组细胞中Brg-1蛋白表达量明显降低.在常氧及乏氧状态下低表达Brg-1可以明显降低HIF-1α及VEGF-A在蛋白表达量.在常氧状态下,Lenti-sh-Brg-1组细胞Brg-1(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.53±0.08,t=5.292,P＜0.01),HIF-1 α(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.61±0.07,t=5.380,P＜0.01),VEGF-A mRNA 水平低于 Lenti-con 组(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.38±0.10,t=6.169,P＜0.01);在乏氧状态下,Lenti-sh-Brg-1 组细胞 Brg-1(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.07±0.02,t=44.680,P＜0.01),HIF-1α(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.21±0.05,t=14.280,P＜0.01),VEGF-A mRNA 水平低于 Lenti-con 组(con 1.00±0 比 sh-Brg-1 0.15±0.06,t=13.960,P＜0.01).最后证实在常氧和乏氧条件下,Brg-1低表达细胞条件培养基组的人脐静脉内皮细胞体外成管数目低于对照组(常氧,con 55.67±7.22比sh-Brg-1 22.33±5.36,t=3.706,P＜0.05;乏氧,con 66.33±7.62 比 sh-Brg-1 35.68±4.91,t=3.382,P＜0.05).结论 在LoVo细胞系中低表达Brg-1可以通过下调HIF-1α抑制血管形成.