基于网络药理学研究大补元煎防治AD的作用机制及AMPK/SIRT1信号通路验证

目的：通过网络药理学和分子对接技术探究大补元煎防治阿尔茨海默病（AD）的作用机制，并利用动物实验验证所发现的分子机制。方法：网络药理学分析大补元煎抗AD有效成分及作用靶点。利用AutoDock和PyMOL软件对药物的核心成分与核心蛋白进行分子对接验证。最后给予AD模型小鼠大补元煎治疗，并验证所发现的核心通路。结果：共筛选出80个有效活性成分和107个疾病作用靶点。大补元煎治疗AD的作用靶点有95个，其中核心靶点有35个。GO富集发现主要涉及程序性细胞死亡过程、细胞凋亡和信号转导调节等。KEGG信号通路富集发现主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路、Wnt信号通路、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）信号通路等。Morris水迷宫实验显示，大补元煎可减少AD小鼠的平台潜伏期，并增加小鼠的穿越平台次数和目标象限时间。免疫组化实验显示，大补元煎可增加AD小鼠海马CA3区神经元核抗原（NeuN）标记的阳性细胞数。免疫荧光显示，大补元煎可抑制AD小鼠海马CA3区胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙结合蛋白1（IBA1）的表达水平。蛋白免疫印迹（Western blot）实验显示，大补元煎可增加AD小鼠海马中磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶α（AMPKα）和沉默信息调节因子1（SIRT1）的表达水平。结论：本研究探讨了大补元煎抗AD的作用机制，并发现大补元煎可通过激活AMPK/SIRT1信号通路改善AD认知损伤、神经元丢失和神经炎症。