UPLC-Q-TOF-MS联合网络药理学和实验验证分析黄连水炒吴茱萸治疗慢性结肠炎的作用机制

为阐明樟帮特色炮制品黄连水炒吴茱萸治疗慢性结肠炎的作用机制,该研究采用UPLC-Q-TOF-MS技术、网络药理学和实验验证方法,预测慢性结肠炎的作用靶点和信号通路,并构建慢性结肠炎小鼠模型对核心靶点进行验证.通过UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定出48种化合物;利用SwissTargetPrediction数据库筛选,得到潜在活性成分31种及药物靶点453个;在GeneCards、OMIM、PharmGKB、TDD数据库筛选得到3 960个慢性结肠炎相关靶点,将药物靶点与疾病靶点匹配所得交集靶点导人STRING构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,借助CytoNCA插件筛选出90个关键靶点,筛选出异鼠李素、槲皮素、柠檬苦素、氧化小檗碱等关键成分;利用DAVID数据库对关键靶点进行GO和KEGG富集分析,结果显示靶点主要涉及蛋白质磷酸化的正调节、一氧化氮生物合成过程的正调控、凋亡过程的负调控等生物学过程,通过PI3K-Akt、VEGF、HIF-1、TNF等信号通路发挥治疗慢性结肠炎的作用.构建慢性结肠炎小鼠模型,黄连水炒吴茱萸干预后可改善结肠病理损伤,显著降低白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,抑制PI3K-Akt通路的激活,并降低VEGFA蛋白的表达,从而发挥治疗慢性结肠炎的作用.