基于皮肤TRP通道探讨三伏贴穴位经皮给药渗透机制的研究

目的 研究三伏贴中有效成分芥子碱硫氰酸盐(Sinapine thiocyanate,SPT)和延胡索乙素(Tetrahydropalmatine,THP)对瞬时感受器电位离子通道(Transient receptor potential ion channels,TRP)的影响,以及激活TRP通道后对三伏贴透皮行为的影响,以探究三伏贴经穴位渗透的机制.方法 通过背根神经节细胞Ca2+内流实验考察三伏贴有效成分对TRP通道的激活作用.通过Western blot和免疫荧光法比较肺俞穴与非穴位皮肤中TRPV1和TRPA1表达的差异以及给药后TRPA1表达的变化,并且通过在体滞留和激光共聚焦3D扫描,研究激活TRP通道对三伏贴穴位透皮行为的影响.结果 三伏贴中有效成分SPT可以促进TRP通道介导的Ca2+内流.大鼠肺俞穴皮肤TRPV1、TRPA1的表达量显著高于非穴位皮肤(P<0.05),三伏贴持续作用后肺俞穴和非穴位皮肤TRPA1的表达量下降.皮肤TRPV1和TRPA1被激活后,经肺俞穴皮肤渗透的SPT和THP的皮肤滞留量均显著提高(P<0.05),但对非穴位皮肤的滞留没有明显影响.结论 三伏贴中有效成分SPT对TRP通道具有激活作用,且肺俞穴皮肤TRPV1、TRPA1表达量显著高于非穴位.穴位高表达TRPV1、TRPA1及三伏贴对TRP通道的激活作用为三伏贴穴位敷贴促透的机理之一.