应用羽毛无损鉴别鹌鹑早期性别的方法

试验旨在探寻一种无损、价廉、耗时短,可用于大批量鹌鹑早期性别鉴定的方法.采用4种不同方法(试剂盒法、加热法、碱裂解法和碱裂解-乙醇洗涤法)提取鹌鹑羽毛样品的基因组DNA,使用凝胶电泳检验DNA质量,紫外分光光度计测定其浓度和纯度;选择最佳的羽毛DNA提取方法,应用PCR法检测3日龄鹌鹑的性别.基因组DNA提取电泳结果显示,仅碱裂解-乙醇洗涤法提取的DNA与试剂盒提取的DNA出现条带的位置相同;紫外分光光度计测定结果表明,试剂盒法获得的DNA浓度值远低于其他3种方法,其中碱裂解法浓度最高;OD260/OD280比值以试剂盒法和碱裂解-乙醇洗涤法(裂解10 min)为高,OD260/OD230比值以试剂盒法最高,碱裂解-乙醇洗涤法(裂解10 min)次之.PCR结果显示,除碱裂解法原液无目的条带外,其余各组均出现目的条带;碱裂解法操作步骤少、时间最短,加热法和碱裂解-乙醇洗涤法次之.综合分析选择碱裂解-乙醇洗涤法对70只鹌鹑进行性别鉴定,羽毛PCR鉴定性别结果与性腺解剖结果的符合率为100％,卡方分析检验差异均不显著(P＞0.05).研究表明,4种方法均可以用来处理鹌鹑羽毛样品,并用于鹌鹑的性别鉴定,其中碱裂解-乙醇洗涤法耗时更短、效果好、性价比更高,可用于大批量鹌鹑的早期性别鉴定,也适合用于其他使用PCR开展定性方面的试验.