副猪嗜血杆菌7型微量凝集试验抗体检测方法的建立

近年来,7型副猪嗜血杆菌的分离率明显升高.为建立该菌抗体的快速检测方法,本研究以副猪嗜血杆菌7型GS122株灭活菌体为抗原,通过优化各反应条件建立了微量凝集试验(MAT)抗体检测方法.结果显示,凝集抗原的最佳反应浓度为2.0×109 CFU/mL,最佳反应温度和时间为37℃、8～9h.采用该方法对猪瘟、猪链球菌病等9种常见猪传染病阳性血清的检测结果均为阴性(效价≤1∶ 2),与4型、5型和12型有轻微的交叉反应(效价≤1 ∶4).敏感性试验和疫苗免疫抗体检测结果显示,该方法能检测到副猪嗜血杆菌7型GS122株灭活疫苗免疫仔猪后第14天的血清抗体(效价≥1∶ 4),首免后第21天和二免后第14天(首免后第35天)的血清抗体效价分别达到1 ∶16和1 ∶32以上.重复性试验表明,批内、批间重复性良好.利用该方法对718份临床血清样品的检测结果表明,在河南省部分区域的猪群中存在副猪嗜血杆菌7型感染.本研究结果为副猪嗜血杆菌7型的疫苗抗体评价和流行病学调查奠定了基础.