温阳化浊通络方抑制FOXP3甲基化促进Treg增殖治疗系统性硬化病的作用机制

目的:研究温阳化浊通络方对FOXP3甲基化的影响,探讨其调控Treg细胞增殖治疗系统性硬化病(SSc)的作用机制.方法:收集SSc患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞,用试剂盒分选Treg细胞,同时制备温阳化浊通络方含药血清.含药血清处理Treg细胞后,分别采用CCK-8检测Treg细胞增殖,qRT-PCR检测FOXP3和IL-10 mRNA表达,Western blot检测FOXP3蛋白表达,ELISA法检测IL-10水平,甲基化特异性PCR检测FOXP3基因启动子区和TSDR区甲基化水平.结果:与空白组比较,温阳化浊通络方低、中、高剂量组显著促进Treg细胞的增殖(P＜0.05,P＜0.01),促进IL-10 mRNA和FOXP3蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);温阳化浊通络方高剂量组显著促进FOXP3 mRNA表达(P＜0.01),抑制FOXP3 TSDR区甲基化水平(P＜0.05);温阳化浊通络方中、高剂量组显著增加IL-10水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:温阳化浊通络方可促进Treg细胞的增殖,其机制可能与抑制FOXP3甲基化、促进FOXP3表达有关.