急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的建立及评价

目的:通过比较采用腹腔注射脂多糖(LPS)、结扎冠状动脉及两者不同组合方式建立急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的可行性.方法:将225只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、单纯结扎冠脉组、先注射LPS(5mg·kg)组(结扎冠脉前24h注射LPS)、后注射LPS(5mg·kg)组(结扎冠脉后10 min注射LPS).各组分别于造模后3、24、72 h进行各项指标的检测,对模型的建立进行综合评价.观察各组大鼠的一般状态与中医证候宏观评价指标舌象、脉象,采用心电图、超声心动图评价心功能,伊文思蓝/2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌缺血、梗死面积,生化法或酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白T(cTnT)含量及白细胞介素(IL)-1β、IL-6的变化,血细胞分析仪测定白细胞数,检测凝血四项、血小板聚集率、血液流变学等凝血评价指标,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织.结果:造模3 h后,与假手术组比较,单纯结扎冠脉组大鼠舌面R、G、B值显著下降(P＜0.01),舌下络脉色泽显著变紫(P＜0.01),脉搏幅度显著降低(P＜0.01),心功能下降,血清CK、LDH、cTnT、IL-1β、IL-6含量明显上升(P＜0.05),心肌梗死面积显著增大(P＜0.01),白细胞总数明显增加,差异具有明显统计学意义(P＜0.05);与单纯结扎组比较,先注射LPS组、后注射LPS组舌下络脉增长,舌面R值均下降,cTnT含量显著增加(P＜0.01),后注射LPS组舌面B值下降,心输出量(CO)明显降低(P＜0.05),IL-1β含量上升,LVAWs显著变薄(P＜0.01).造模24 h后,与假手术组比较,单纯结扎组舌面R、G、B值显著下降,舌下络脉加长、色泽紫暗(P＜0.01),脉搏幅度显著降低(P＜0.01),心功能下降,心肌梗死面积增大(P＜0.01),全血黏度增高,血小板聚集率变大,FIB增高,PT、TT显著缩短(P＜0.01),白细胞总数显著增加,差异具有明显统计学意义(P＜0.01),血清CK、LDH、cTnT、IL-6含量上升,差异具有明显统计学意义(P＜0.05);与单纯结扎组比较,先注射LPS组、后注射LPS组脉搏幅度下降,舌面R、G、B值显著降低(P＜0.01),舌下络脉加深加长(P＜0.05),左室射血分数(EF)及左室缩短率(FS)分值下降(P＜0.05),cTnT含量均上升(P＜0.01),后注射LPS组LVPWs变薄,LDH含量上升,血小板聚集率增高(P＜0.05),心肌梗死面积明显增大,TT显著缩短(P＜0.01),白细胞总数增加,IL-1β水平上升,差异具有明显统计学意义(P＜0.05).造模72 h后,与假手术组比较,单纯结扎组脉搏幅度明显降低,舌面R、G、B值下降,舌下络脉加粗增长(P＜0.01),心功能下降,cTnT含量增加,FIB含量上升,血液黏稠度增高(P＜0.01),血小板聚集率增高,IL-6、IL-1β水平上升,差异具有明显统计学意义(P＜0.05);与单纯结扎组比较,先注射LPS组、后注射LPS组舌下络脉颜色更紫,cTnT含量均上升(P＜0.01);后注射LPS组脉搏幅度降低,舌面R、G、B值下降,心肌梗死面积增大,差异具有显著统计学意义(P＜0.01),EF、FS分值降低,差异具有明显统计学意义(P＜0.05).结论:大鼠冠脉结扎10 min后注射LPS在24 h时,与其他造模方法及不同造模时间点制备的模型比较,更符合急性冠脉综合征瘀毒互结证的临床发病特征.