miR-374b-5p靶向VEGFC对肺癌细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化的影响

目的 探讨微小RNA-374b-5p（miR-374b-5p）靶向血管内皮生长因子（VEGF）C对肺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化（EMT）的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Western印迹分别检测人支气管上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p、VEGFC蛋白表达水平；采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-374b-5p和VEGFC的靶向关系；将miR-374b-5p mimics（mimics组）及其阴性对照（NC组）转染至H1299细胞中，实时荧光定量PCR检测miR-374b-5p表达水平；另设mimics+pcDNA3.1组（共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1空载体质粒）和mimics+VEGFC组（共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1-VEGFC过表达质粒）,采用划痕实验检测细胞迁移，Transwell小室实验检测细胞侵袭，Western印迹检测VEGFC蛋白和EMT相关蛋白E-钙黏蛋白（cadherin）、N-cadherin和波形蛋白（Vimentin）表达水平。结果 与BEAS-2B细胞比较，A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p表达水平明显降低，而VEGFC蛋白表达水平明显升高，且H1299细胞变化最为显著（P＜0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实miR-374b-5p可与VEGFC靶向结合。与NC组比较，mimics组细胞中miR-374b-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高，细胞迁移、侵袭能力明显减弱且细胞中VEGFC、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）;与mimics+pcDNA3.1组比较，mimics+VEGFC组细胞迁移、侵袭能力明显增强且细胞中VEGFC、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显升高，而E-cadherin蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）。结论 miR-374b-5p过表达可通过靶向调控VEGFC抑制肺癌H1299细胞迁移、侵袭和EMT。