藏药复方冠心宁颗粒对缺氧复氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用及机制研究

目的:研究藏药复方冠心宁颗粒（Guan Xin Ning Granules,GXN）对缺氧复氧（Hypoxia and Reoxygenation,HR）损伤大鼠H9c2心肌细胞的保护作用及可能机制。方法:将大鼠心肌细胞在无血清的培养基中缺氧孵育4 h后再复氧孵育24 h,以建立心肌细胞缺氧复氧损伤模型,并随机分为对照组、模型组、卡托普利组（阳性对照组）和GXN组（0.5μg/mL、5μg/mL、20μg/mL）。采用CCK-8法测定细胞活力,试剂盒测定细胞内乳酸脱氢酶（LDH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）、Na + -K + -ATPase和Ca 2+ -ATPase的活性以及线粒体膜电位,流式细胞技术测定细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法（qRT-PCR）测定局部粘着斑激酶（FAK）、磷脂酰肌醇激酶（PI3K）和蛋白激酶B（Akt）基因mRNA的表达情况。结果:与对照组相比,心肌细胞经过缺氧复氧处理后,细胞活力、细胞内LDH含量和SOD、GSH-Px、CAT、Na + -K + -ATPase、Ca 2+ -ATPase的活性以及线粒体膜电位均显著下降（P＜0.01）,细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）,FAK的mRNA表达显著下调（P＜0.05）;不同浓度的GXN干预后,细胞活力、细胞内LDH含量和SOD、GSH-Px、CAT、Na + -K + -ATPase、Ca 2+ -ATPase活性以及线粒体膜电位较模型组均显著升高（P＜0.05或0.01）,细胞凋亡率显著下降（P＜0.01）,FAK、PI3K和Akt基因的mRNA表达显著上调（P＜0.05或0.01）。结论:GXN对缺氧复氧损伤大鼠心肌细胞具有明显的保护作用,其机制可能与GXN抗氧化应激和抑制细胞凋亡有关。