左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群的影响

目的观察左归丸加减对雌激素缺乏骨丢失模型小鼠脾脏辅助性T细胞亚群17（Th17）/调节性T细胞亚群（Treg）亚群平衡的影响,并探讨其作用机制。方法 50只BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为假手术组、卵巢切除模型组、左归丸加减（简称中药）小、中、大剂量组,共5组,每组10只。中药组分别给予中药小、中、大剂量（7.25、14.50、29.00 g/kg）,1天1次,1次约0.5 m L,连续用药12周;同时假手术组及模型组给予等量的生理盐水。采用酶联免疫吸附（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）法检测各组血清雌二醇（E2）水平,双能X线骨密度仪检测股骨骨密度（bone mineral density,BMD）,流式细胞仪胞内外双染色法检测脾脏单个核细胞Th17/Treg亚群比例,RT-PCR法检测脾脏单个核细胞IL-17A、TGF-βmRNA表达。结果与假手术组比较,模型组E2、BMD均降低（P<0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值均升高（P<0.05）,Treg亚群比例明显降低（P<0.05）,IL-17A mRNA表达明显升高（P<0.05）,TGF-βmRNA表达明显降低（P<0.05）;与模型组比较,中药中、大剂量组BMD值明显升高（P<0.05）,Th17亚群比例、Th17/Treg比值降低（P<0.05）、Treg亚群比例升高（P<0.05）,IL-17A mRNA表达降低（P<0.05）及TGF-βmRNA表达升高（P<0.05）。相关性分析显示BMD与血清E2水平、Treg亚群比例呈明显正相关（P<0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P<0.05）;血清E2水平与Treg亚群比例呈明显正相关（P<0.05）,与Th17亚群比例呈明显负相关（P<0.05）。结论 Th17/Treg亚群平衡状态与雌激素缺乏骨丢失存在相关性,左归丸加减能降低雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17亚群比例,升高雌激素缺乏骨丢失小鼠Treg亚群比例。左归丸加减可能通过调节雌激素缺乏骨丢失小鼠Th17/Treg亚群平衡达到治疗作用,且该方无明显雌激素样作用。