miR-320通过抑制TLR4/NF?κB信号通路减轻大鼠烧伤后肠道黏膜损伤
wf(2022)
Abstract
目的 探讨miR-320在大鼠烧伤后肠道黏膜损伤中的保护作用,及其作用机制是否与抑制TLR4/NF?κB信号通路有关.方法 SD大鼠随机分为4组(n=12):假手术组、假手术+miR?320组、烧伤组和烧伤+miR?320组.烧伤组和烧伤+miR?320组建立Walker?Mason烧伤模型.烧伤+miR?320组和假手术+miR?320组在模型建立前1周通过尾静脉注射腺相关病毒(AAV)?miR?320.通过FITC?葡聚糖测定评估肠道通透性.用RT?qPCR评估miR?320基因表达,并通过蛋白质印迹评估Occludin、ZO?1和TLR4/NF?κB信号通路蛋白水平.在LPS处理前,用miR?320模拟物转染NCM460细胞,并测量TNF?α和IL?6细胞因子水平.结果 与假手术组相比,烧伤组肠黏膜绒毛水肿、变短、变宽,肠黏膜明显受损,有大量炎性细胞浸润.此外,烧伤会增加DAO和FITC?葡聚糖血清水平(P<0.05)并降低肠道组织中miR?320、Occludin和ZO?1表达(P<0.05).注射了miR?320模拟物的大鼠从损伤中恢复,并且TLR4、MyD88蛋白的表达和p?NF?κB(p?p65)磷酸化均显著降低(P<0.05).体外实验证实TLR4是miR?320的潜在靶基因,并且miR?320上调逆转了LPS诱导NCM460细胞的TLR4/NF?κB通路激活(P<0.05),减少了培养基中TNF?α和IL?6的浓度(P<0.05).结论 烧伤诱导的肠屏障功能障碍中miR?320水平降低.miR?320的上调通过抑制TLR4/MyD88//NF?κB信号通路来减少炎症反应并改善肠道屏障功能.
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