马齿苋总黄酮通过调控TRB3表达对支气管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

目的探讨马齿苋总黄酮（PTF）是否通过调控tribbles同源蛋白3（tribbleshomolog3，TRB3）表达影响缺氧/复氧（H/R）诱导的支气管上皮细胞损伤。方法体外培养人支气管上皮细胞BEAS-2B，建立H/R诱导的细胞损伤模型，使用低(10mg·L -1 )、中(20mg·L -1 )、高浓度(40mg·L -1 )PTF处理细胞；用试剂盒检测乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase，LDH）、丙二醛（malondialedhyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）的含量；流式细胞术检测细胞凋亡率；采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）与Westernblot法分别检测TRB3的mRNA及蛋白表达水平；再将si-TRB3、pcDNA-TRB3分别转染至BEAS-2B细胞，采用上述方法检测转染后LDH、MDA、SOD的水平及细胞凋亡率；Westernblot法检测B淋巴细胞瘤-2（B-celllymphoma-2，Bcl-2）、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白（Bcl-2-associatedXprotein，Bax）蛋白表达量。结果与对照组比较，H/R组LDH、MDA的水平升高，SOD的水平降低，细胞凋亡率升高，Bax蛋白水平升高，Bcl-2蛋白水平降低，TRB3mRNA及蛋白水平升高；与H/R组比较，H/R+PTF不同浓度组LDH、MDA的水平均降低，SOD的水平升高，细胞凋亡率降低，Bax蛋白水平降低，Bcl-2蛋白水平升高，TRB3mRNA及蛋白水平降低；与H/R+si-NC组比较，H/R+si-TRB3组LDH、MDA的水平降低，SOD的水平升高，细胞凋亡率降低，Bax蛋白水平降低，Bcl-2蛋白水平升高；TRB3过表达可减弱PTF对H/R诱导的支气管上皮细胞损伤的作用。结论马齿苋总黄酮可能通过下调TRB3的表达从而减轻H/R诱导的支气管上皮细胞损伤。