生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为

目的 研究生理性流动条件下血小板在玻璃表面的聚集行为。方法 采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷（polydimethylsiloxane, PDMS）-玻璃微通道芯片。将抗凝人外周全血以300、1 500 s -1 壁剪切率流过微通道芯片，倒置荧光显微镜拍摄荧光标记血小板在微通道玻璃表面形成的血小板聚集体荧光图像，通过图像分析得到血小板聚集体数量、平均尺寸、表面覆盖率和平均荧光强度。分别对玻璃表面进行亲水性处理、牛血清白蛋白（bovine serum albumin, BSA）封闭和胶原纤维蛋白修饰处理，调整血液样品红细胞比容（hematocrit, Hct）,用抗血小板制剂处理血液样品，观察上述条件下血小板在玻璃表面的聚集行为；比较分析健康人群和糖尿病患者的血小板聚集情况。结果 流动条件下，血小板在玻璃表面发生聚集形成三维血小板聚集体；血小板聚集依赖于壁剪切率大小、玻璃表面亲疏水性和Hct;血小板聚集主要由血小板膜糖蛋白GPIIb/Ⅲa-纤维蛋白原和ADP-P2Y 12 受体通路调控；血小板在玻璃表面的聚集能够反映糖尿病患者血小板的高活化状态。结论 在300、1 500 s -1 流动条件下，血小板在玻璃表面的聚集与剪切率、蛋白吸附、血小板相关受体和血小板自身活化状态相关。本文建立了一种无需额外黏附蛋白修饰的微流控血小板功能分析的新模型，可用于临床血小板功能评估。