LncRNA-MALAT1通过调节SIRT1介导的肝星状细胞活化调控2型糖尿病并发肝纤维化的机制研究

目的研究lnc-MALAT1在高葡萄糖诱导的肝星状细胞活化及肝纤维化的作用及分子机制方法在IG12细胞株中构建高葡萄糖（high glucose，HG，45mM）和常规葡萄糖（normal glucose，NG，5.5mM）培养模型，观察高葡萄糖诱导对α-SMA等成纤维细胞标志物及lnc-MALAT1表达的影响。在普通培养的细胞株中，过表达lnc-MALAT1后通过蛋白印迹法检测α-SMA等成纤维细胞标志物的表达。染色质免疫共沉淀检测过表达lnc-MALAT1及敲低FOXO1表达对lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合的影响。蛋白印迹法检测敲低lnc-MALAT1及过表达SIRT1对TGF-β信号通路的影响。结果在IG12细胞株中，HG组的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（vimentin）、结蛋白（desmin）、胶原蛋白（collagen）V等表达明显升高，lnc-MALAT1表达也明显升高。在普通培养的细胞株中过表达lnc-MALAT1，α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、结蛋白、胶原蛋白V等表达也明显升高。在IG12细胞系中过表达lnc-MALAT1，lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合增多。在过表达lnc-MALAT1的基础上，进一步用靶向FOXO1的siRNA敲低FOXO1表达，则lnc-MALAT1与SIRT1启动子结合有所减少。使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达，SIRT1和TGF-β1的表达降低，SMAD2和SMAD3的磷酸化水平降低，但SMAD2/3总蛋白的表达没有明显改变。在使用siRNA敲低lnc-MALAT1表达的基础上过表达SIRT1，TGF-β1的表达升高，SMAD2和SMAD3的磷酸化水平升高，SMAD2/3总蛋白的表达没有显著改变。 结论 在高葡萄糖诱导下，lnc-MALAT1通过FOXO1结合SIRT1启动子促进SIRT1的表达并活化下游TGF-β信号通路，激活了肝星状细胞促进了糖尿病肝纤维化。