基于药物代谢酶的乌头碱配伍鞣花酸、甘草苷减毒机制研究

目的 基于细胞色素P450(CYP450)系统研究乌头碱配伍鞣花酸、甘草苷减毒机制.方法 将HepG2细胞分为空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组、乌头碱+鞣花酸组、乌头碱+甘草苷组、乌头碱+鞣花酸+甘草苷组,CCK8法和LDH法分别检测细胞活力和细胞毒性,高内涵分析技术检测细胞数目、DNA和活性氧(ROS)含量及线粒体膜电位(MMP),RT-PCR和Western blot检测CYP1A2、CYP2C9和CYP3A4 mRNA及蛋白表达.结果 与空白组比较,乌头碱组细胞ROS含量显著增加,MMP显著降低(P<0.05),乌头碱+鞣花酸+甘草苷组细胞ROS、MMP差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR和Western blot结果显示,与空白组比较,乌头碱组细胞CYP1A2、CYP3A4 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),甘草苷组细胞CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与乌头碱组比较,乌头碱+鞣花酸+甘草苷组细胞CYP1A2、CYP3A4 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05,P<0.001).结论 乌头碱配伍鞣花酸、甘草苷可上调CYP1A2、CYP3A4表达,减少乌头碱在体内蓄积时间,起到减毒作用.