萝卜蚜LeATPf基因的克隆及其RNA干扰制剂对萝卜蚜的防治效果研究

【目的】克隆萝卜蚜Lipaphis erysimi（Kaltenbach）的三磷酸腺苷合酶f亚基（ATP synthases subunit f,LeATPf）基因，并利用RNA干扰技术抑制该基因表达，分析复配RNA干扰剂对萝卜蚜的防治效果，推动以RNA干扰为核心的害虫绿色防控新技术。【方法】利用同源克隆技术获得萝卜蚜LeATPf基因的全长cDNA，通过RNA干扰技术沉默其基因表达；采用浸叶法测定不同浓度的复配RNA干扰剂对萝卜蚜的杀虫效果，并通过田间小区试验测定RNA干扰剂对萝卜蚜的虫口减退率和田间防治效果。【结果】萝卜蚜LeATPf基因编码长度为324bp的cDNA序列，与其它5种蚜虫的ATPf基因同源性在88%以上，且LeATPf基因主要在2龄期萝卜蚜中表达；喷施RNA干扰剂可有效抑制LeATPf基因的表达，且高浓度的RNA干扰剂（200.00 mg/L）对萝卜蚜的室内杀虫效果与吡虫啉处理组无显著差异（P＞0.05）；在田间试验中，中高浓度的RNA干扰剂（50.00、100.00和200.00mg/L）在处理后第3和第7天对萝卜蚜的虫口减退率和防治效果与吡虫啉处理组无显著差异（P＞0.05），但在处理后14d对萝卜蚜的虫口减退率和防治效果显著高于吡虫啉处理组（P＜0.05）。【结论】针对LeATPf基因设计并配置的中高浓度的RNA干扰剂对萝卜蚜的防治效果与吡虫啉相当，但是其药效持续性优于吡虫啉；LeATPf基因是开发萝卜蚜RNA干扰制剂的良好靶标基因。