丹参酮ⅡA磺酸钠通过SIRT1/p53途径改善HK-2细胞的炎症损伤

目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)能否通过SIRT1/p53途径抑制炎症反应，从而延缓脓毒性肾损伤的发生。方法:将人肾小管上皮细胞(HK-2)体外培养，随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、STS组(LPS+STS)、SIRT1抑制剂(EX-527)组(EX-527+STS+LPS)。对照组加入等量PBS；LPS组给予1 mg/L LPS干预12 h；STS组给予30 μmol/L STS预处理2 h后，加入1.0 mg/L LPS干预12 h；EX-527组在25 μmol/L EX-527预处理2 h后，加入LPS 1.0 mg/L和STS 30 μmol/L干预12 h。采用CCK-8检测细胞的增殖活性；采用酶联免疫吸附法检测HK-2细胞上清液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、内二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的表达量；采用免疫印迹法(Western-blot)检测SIRT1、p-p53蛋白表达量；采用实时荧光定量PCR检测SIRT1、p-p53 mRNA表达量。结果:与对照组相比，LPS组的HK-2细胞增殖活性显著下降( P<0.01)。LPS组的TNF-α、IL-6水平高于对照组，STS组的TNF-α、IL-6水平低于LPS组，EX-527组的TNF-α、IL-6水平高于STS组，但低于LPS组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)；LPS组的MDA水平高于对照组，STS组的MDA水平低于LPS组，EX-527组的MDA水平高于STS组，低于LPS组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)；LPS组的SOD水平低于对照组，STS组的SOD水平高于LPS组，EX-527组的SOD水平高于STS组和LPS组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。LPS组的SIRT1蛋白表达量低于对照组，p-p53蛋白表达量高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；STS组的SIRT1蛋白表达量高于LPS组，而p-p53蛋白表达量低于LPS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05); EX-527组的SIRT1蛋白表达量低于STS组，p-p53表达量高于STS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。LPS组的SIRT1 mRNA表达量低于对照组，p-p53 mRNA表达量高于对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.05); STS组的SIRT1 mRNA表达量高于LPS组，而p-p53 mRNA表达量低于LPS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；EX-527组的SIRT1 mRNA表达量低于STS组，p-p53 mRNA表达量高于STS组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:STS可通过上调SIRT1表达而抑制p-p53生成，进而抑制HK-2细胞的炎症反应及抗氧化作用，延缓肾小管损伤发生，具有一定肾脏保护作用。