凋亡相关蛋白Caspase-3在功能性消化不良大鼠小肠Cajal间质细胞中的表达及意义

目的 通过中药方剂灌胃建立功能性消化不良(FD)大鼠模型,研究其小肠Cajal间质细胞(ICC)中凋亡相关蛋白Caspase-3蛋白及mRNA的表达,探讨Caspase-3在FD大鼠小肠ICC中的表达及意义.方法 选用80只SPF级的Wistar成年大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(n=30)和FD模型组(n=50).对照组大鼠生理盐水灌胃,FD模型组用中药方剂灌胃建立FD大鼠动物模型.喂养和造模过程中观察并测量两组大鼠的一般情况和体重变化,造模后测定尿D-木糖排泄率和小肠推进率,然后颈椎脱臼法处死大鼠,取距幽门远端8 cm处小肠并通过免疫荧光法测定ICC的数量及分布,透射电镜观察ICC形态学变化,Western blot及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ICC中Caspase-3蛋白及mRNA的表达.结果 与对照组相比,FD模型组大鼠的平均体重明显下降,体重增长减缓,尿D-木糖排泄率明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05),说明模型组成功建立了 FD模型.与对照组相比,FD模型组的小肠ICC体积变小,细胞器减少,细胞质肿胀甚至空泡化,与周围平滑肌细胞和神经纤维末梢之间的连接结构存在不同程度的紊乱及破坏.激光共聚焦显微镜荧光定量分析显示,FD模型组大鼠小肠组织内ICC的分布较对照组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,FD模型组的大鼠小肠ICC中Caspase-3的蛋白和mRNA相对表达量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠ICC的形态结构变化在FD发病中发挥作用,Caspase-3高表达导致的小肠ICC凋亡是FD症状的可能原因.