分光光度计法在甘蔗白条病致病菌菌液浓度测定上的应用

采用分光光度计法,建立快速准确测定白条黄单胞杆菌菌液浓度的方法.首先在4个波长下,以分光光度计测定的不同稀释浓度白条黄单胞杆菌菌悬液光密度值(OD值)为自变量x,以平板计数法获得的对应稀释浓度菌悬液细菌浓度为因变量y,分别建立二者间的标准曲线和线性回归方程;根据回归方程的决定系数(R2)最大化、均方根误差(RMSE)和相对均方根误差(NRMSE)最小化原则筛选出最适波长和最优线性回归方程,最终实现菌悬液浓度的快速估算.结果表明,在4个波长下,平板计数法测定的白条黄单胞杆菌菌液浓度(0.5×108～12.5×108 cfu/mL)与分光光度计测定的OD值(0.03～1.95)之间线性关系良好,其中在600 nm波长下建立的标准曲线线性回归方程y=11.263x+0.117为最优方程,决定系数R2为0.9967,绝对误差RMSE为0.26×108 cfu/mL,相对误差NRMSE为4.93％.通过进一步应用验证,该回归方程预测结果与平板计数结果无显著差异(P>0.05).研究结果可靠准确,可作为测定白条黄单胞杆菌菌液浓度的标准方法进行应用.