基于p16通路探索参黄冲剂对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:探究参黄冲剂对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:利用不同浓度(0、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2和6.4 g/L)的参黄冲剂处理SH-SY5Y细胞48 h后,用CCK-8法检测不同浓度的参黄冲剂对SH-SY5Y细胞活力的影响.在此基础上设置空白组、模型组及低、中、高剂量参黄冲剂组.采用倒置相差显微镜观察细胞形态,Hoechst 33342荧光染色法观察细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western blot分析细胞凋亡、细胞周期及p16信号通路相关蛋白的表达变化.结果:与模型组相比,参黄冲剂给药组细胞凋亡率降低,抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高,促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase-3表达下降;同时,参黄冲剂可以逆转由Aβ25-35导致的G0/G1期阻滞;与模型组相比,参黄冲剂可以上调p16蛋白的表达,下调p16下游细胞周期相关蛋白CDK4、CDK6、cyclin D1和p-RB的表达.结论:参黄冲剂可能通过干预p16信号通路,逆转Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞周期阻滞,抑制SH-SY5Y细胞凋亡.