丝胶通过调节miR-346表达对高糖致足细胞损伤的保护作用

目的 探讨丝胶通过调节miR-346表达对高糖致足细胞损伤的保护作用.方法 以条件永生化小鼠足细胞为研究对象,实验分为正常(NG)组、高渗(MG)组、高糖(HG)组、丝胶低剂量(LS)组、丝胶中剂量(MS)组及丝胶高剂量(HS)组,分别采用5.5 mmol/L葡萄糖、5.5 mmol/L葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇、30 mmol/L葡萄糖、30 mmol/L葡萄糖+150μg/ml丝胶、30 mmol/L葡萄糖+300μg/ml丝胶、30 mmol/L葡萄糖+600μg/ml丝胶的含血清及双抗培养液培养足细胞48 h.采用免疫印迹法检测各组足细胞Nephrin蛋白表达,以确定高糖致足细胞损伤模型是否成功建立;采用Real time PCR法检测各组足细胞miR-346及白细胞介素(IL)-18 mRNA表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组足细胞IL-18蛋白表达,以确定丝胶的最佳作用浓度.采用miR-346抑制剂(MicrOFF mmu-miR-346-5p inhibitor)转染足细胞抑制miR-346的表达后,给予最佳浓度的丝胶进行干预,观察足细胞IL-18表达.结果 与NG组比较,HG组足细胞Nephrin蛋白表达明显降低(P<0.05).丝胶各处理组足细胞miR-346 mRNA表达较HG组明显升高,其中HS组最高(P<0.05);IL-18表达较HG组明显降低,其中HS组最低(P<0.05).特异性抑制足细胞miR-346表达,足细胞IL-18表达明显升高(P<0.05);给予600μg/ml的丝胶进行干预,被抑制miR-346表达的足细胞中IL-18表达明显降低(P<0.05).结论 丝胶可通过提高miR-346表达来减轻炎症反应,进而对高糖所致的足细胞损伤起保护作用.