冬凌草甲素对海水冲溺伤骨折愈合的影响及作用机制

目的 探究冬凌草甲素对海水冲溺伤骨折愈合的影响及作用机制.方法 取72只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠构建小鼠海水冲溺伤骨折模型,并将其随机分为骨折组、骨折+冬凌草甲素组、冲溺伤骨折组和冲溺伤骨折+冬凌草甲素组,每组18只.术后14 d拍摄股骨X线片并在术后21 d通过股骨机械强度试验观察冬凌草甲素对骨折愈合影响的表型变化.术后14 d取小鼠骨痂组织,采用qPCR和蛋白质印迹法检测M1型巨噬细胞标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS),M2型巨噬细胞标志分子CD206,炎症因子环氧合酶2(COX2)、IL-1β,促凋亡因子cleaved caspase 3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及抗凋亡因子Bcl-2的表达水平.术后7 d,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞活化情况.结果 X线片及股骨机械强度试验结果显示冲溺伤骨折组小鼠骨折愈合减弱,而冬凌草甲素改善了冲溺伤骨折愈合并提高了股骨承受的扭转力(P均<0.01).qPCR和蛋白质印迹法检测结果显示,与冲溺伤骨折组相比,冲溺伤骨折+冬凌草甲素组小鼠骨痂组织中iNOS、COX2、IL-1β、cleaved caspase 3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均降低,CD206、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05,P<0.01).TRAP染色结果显示,与冲溺伤骨折组相比,冲溺伤骨折+冬凌草甲素组小鼠软骨-骨边界附近破骨细胞数量减少(P<0.01).结论 冬凌草甲素通过增强抗炎性的M2型巨噬细胞极化和抑制促炎性的M1型巨噬细胞极化减轻骨折后的炎症反应、减少细胞凋亡、抑制破骨细胞过度激活,从而促进海水冲溺伤骨折愈合.