长链非编码RNA ATB对三阴性乳腺癌细胞的增殖、凋亡及上皮间充质转化的影响

目的 探索三阴性乳腺癌细胞(triple negative breast cancer,TNBC)中长链非编码RNA ATB(long non-coding RNA activated by transforming growth factorβ,lncRNA ATB)对其增殖、凋亡、侵袭及上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用.方法 收集2020年1月至2020年12月蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科行手术治疗的18例TNBC患者的癌组织,以对应的癌旁组织作为对照.qRT-PCR检测lncRNA ATB在TNBC癌组织及癌旁组织中的表达.qRT-PCR检测lncRNA ATB在TNBC细胞MDA-MB-231与人乳腺上皮细胞MCF-10A中的表达情况.下调MDA-MB-231细胞中lncRNA ATB的表达为si-ATB组,并检测沉默效率,阴性小干扰RNA作对照,为si-NC组.CCK-8、流式细胞仪、划痕实验、Transwell实验分别检测下调lncRNA ATB对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响.Western blot检测下调lncRNA ATB对MDA-MB-231细胞中上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、N-cadherin的影响.结果 相比癌旁组织,lncRNA ATB在TNBC组织中的表达明显增加(P<0.05).相比人乳腺上皮细胞MCF-10A,TNBC细胞MDA-MB-231中lncRNA ATB的表达明显增加(P<0.05).CCK-8结果显示相比si-NC组,si-ATB组MDA-MB-231细胞的增殖能力在48,72,96 h时明显减弱(均P<0.05).流式细胞仪结果显示相比si-NC组,si-ATB组MDA-MB-231细胞的凋亡率明显增加(12.24％±1.52％vs 24.33％±2.15％,P<0.05).相比si-NC组,划痕实验结果显示si-ATB组MDA-MB-231细胞的迁移能力明显减弱(61.0％±5.0％vs 31.7％±3.3％,P<0.05).相比si-NC组,Transwell实验结果显示si-ATB组MDA-MB-231细胞的侵袭能力明显减弱(40.33±3.51 vs 15.67±2.52,P<0.05).Western blot结果显示,相比si-NC组,si-ATB组E-cadherin蛋白在MDA-MB-231细胞中的相对表达量明显增加(0.42±0.04 vs 0.63±0.05,P<0.05);相比si-NC组,si-ATB组vimentin蛋白在MDA-MB-231细胞中的相对表达量明显减弱(0.55±0.05 vs 0.32±0.04,P<0.05);相比si-NC组,si-ATB组N-cadherin蛋白在MDA-MB-231细胞中的相对表达量明显减弱(0.62±0.06 vs 0.38±0.04,P<0.05).结论 下调lncRNA ATB的表达能够增加TNBC细胞MDA-MB-231的凋亡进而减弱其增殖能力,同时参与了MDA-MB-231细胞EMT的逆转过程,减弱其迁移、侵袭的能力.