石胆草碳苷B改善阿尔茨海默病小鼠模型的研究

目的:探究石胆草碳苷B(CB)对淀粉样β蛋白片段25-35(Aβ25-35)诱导阿尔茨海默病(AD)的干预作用及其作用机制,为临床治疗AD提供实验基础.方法:将40只雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组、多奈哌齐组(10 mg·kg-1)、CB组(10 mg·kg-1).除正常组外,其余各组小鼠脑内注射Aβ25-35(300μmol·L-1)建立AD小鼠模型.Y迷宫、新物体识别实验检测小鼠学习记忆能力;HE染色、尼氏染色和电镜观察海马病理变化;酶联免疫吸附法检测脑内Aβ1-42/Aβ1-40、磷酸化Tau蛋白(p-Tau)水平;生化法检测血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量或活性;流式细胞术检测脑内活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹法(WB)检测脑内LC3 B,Beclin-1和P62相关自噬蛋白水平.体外培养PC-12细胞,结合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),观察CB对Aβ25-35诱导PC-12细胞的影响是否与自噬有关,从而进一步阐释CB干预AD的作用机制.结果:行为学结果显示CB可显著改善Aβ25-35诱导小鼠的学习记忆能力,HE及尼氏染色显示CB可显著改善海马损伤及神经元萎缩,试剂盒检测结果显示CB可显著降低小鼠脑内Aβ1-42/Aβ1-40,p-Tau和氧化应激水平,WB结果显示CB可显著增强自噬水平;体外实验结果表明,CB可显著提高PC-12细胞迁移能力及增殖能力,但在加入3-MA后其作用显著减弱.结论:CB可能通过增强自噬来减轻Aβ25-35诱导的AD模型损伤.