基于MH7A细胞迁移、凋亡及NLRP3炎性小体探讨金铁锁总皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制

目的:探讨金铁锁总皂苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)增殖、迁移、凋亡及相关炎性因子的影响及其机制.方法:培养MH7A细胞,给予不同浓度的金铁锁总皂苷(0.05、0.10、0.15μg/mL)干预后,采用Annexin V/PI染色后流式细胞仪检测MH7A细胞凋亡;细胞划痕法测定MH7A细胞迁移;接着将细胞分为空白对照组、模型组、mcc950(1μmol/L)阳性对照组及金铁锁总皂苷各浓度(0.05、0.10、0.15μg/mL)组,采用MTS比色法检测MH7A细胞增殖;蛋白免疫印迹法、免疫荧光、q-PCR检测各组细胞NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达;ELISA试剂盒及q-PCR检测炎性因子IL-1β、IL-18、IL-6炎性因子的释放及mRNA表达.结果:与空白对照组比较,金铁锁总皂苷呈浓度依赖性显著升高MH7A细胞凋亡率(P<0.01);中、高浓度金铁锁能显著抑制MH7A细胞迁移(P<0.01).与模型组比较,不同浓度金铁锁总皂苷能显著降低TNF-α 导致的炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6的释放及其mRNA表达,并能抑制TNF-α诱导的MH7A细胞内NLRP3、ASC mRNA及蛋白表达(P<0.01).结论:金铁锁总皂苷能抑制NLRP3炎性小体激活,其机制可能与抑制MH7A细胞的增殖、迁移和诱导其凋亡有关.