高效液相色谱-超滤法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷的蛋白结合率

目的 建立毛蕊花糖苷血浆蛋白结合率的测定方法,比较常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷蛋白结合率的异同.方法 将大鼠置于低压低氧动物实验舱中,于海拨7 500 m下缺氧暴露3d制备缺氧大鼠模型.采用超滤法处理样品,结合高效液相色谱(HPLC)法测定常氧及缺氧大鼠血浆中毛蕊花糖苷游离型药物浓度(Cf)和总药物浓度(Ct),并考察超滤膜非特异性结合率(NSB),对Cf进行矫正后,计算血浆蛋白结合率.结果 大鼠血浆中毛蕊花糖苷浓度为3、6、12μg·mL-1时,毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(62.02±8.51)％、(60.17±5.59)％和(62.60±3.77)％;与缺氧大鼠血浆的蛋白结合率分别为(32.79±4.20)％、(33.16±1.74)％和(32.72±2.20)％,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 毛蕊花糖苷与常氧大鼠血浆蛋白属于中强度结合,且在研究的浓度范围内,不具浓度依赖性,而毛蕊花糖苷与缺氧大鼠血浆蛋白结合强度明显低于常氧大鼠血浆.