基于特异性聚合酶链式反应方法鉴别九味羌活丸中水稻源性成分掺伪

目的 通过DNA条形码技术和建立特异性聚合酶链式反应(PCR)方法,有效鉴别九味羌活丸中的水稻源性成分掺伪问题.方法 通过建立特异性PCR技术对九味羌活丸中掺伪的水稻源性成分样品的GOS9序列进行扩增,并对PCR反应体系与程序、方法学和系统适用性进行考察,从而对掺伪水稻源性成分进行鉴别.结果 该引物体系只针对水稻源性成分DNA进行扩增,与中成药中其他药味的DNA均无交叉扩增,最低能检测到1/1 000掺伪的水稻源性成分DNA.将其应用于3厂家8批次样品中检测,以2％琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,掺伪水稻源性成分的批次在68 bp附近处有一清晰条带,而阴性样品无条带.结论 通过特异性引物PCR扩增、电泳检测和克隆测序的方法,可以有效鉴别九味羌活丸中的水稻源性成分掺伪问题.该方法具有快速、特异、灵敏的优点,为水稻源性成分掺伪的分子生物学鉴定方法提供了参考.