枸杞多糖对光诱导人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用及其机制

目的 研究不同浓度枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对光诱导人视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelium,RPE)细胞(ARPE-19)凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 建立光诱导下ARPE-19细胞损伤模型,分别用不同浓度的枸杞多糖于光照前2h对体外培养的人ARPE-19细胞进行干预;运用MTT法检测细胞活力;流式细胞术(FCM)检测光照对ARPE-19细胞凋亡率的影响;通过蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt(Thr308)、mTOR、p-mTOR蛋白分子表达量变化.实验组分为空白对照组、光损伤模型组以及不同浓度枸杞多糖(10mg/mL,100mg/mL)干预组.结果 与空白对照组比较,光损伤模型组24h、36h ARPE-19细胞活力均显著下降(P＜0.01),且具有时效性,最适光损伤模型时间为24h、光照强度为(16500±200) Lux,在该条件下细胞凋亡率显著升高,p-PI3K、p-Akt(Thr308)、p-mTOR蛋白表达量显著降低(P＜0.01).与光损伤模型组比较,枸杞多糖(10mg/mL,100mg/L)组细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低,p-PI3K、p-Akt(Thr308)、p-mTOR蛋白表达量显著升高(P＜0.01).结论 枸杞多糖可抑制光诱导下ARPE-19细胞凋亡,其机制可能与失活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.