时钟基因Bmal1促进血管平滑肌细胞增殖
Progress in Modern Biomedicine（2022）
Abstract
目的:观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响,进一步探讨生物节律对于血管发育的具体影响.方法:采用包装GV341-Bmal1载体的慢病毒转染的方法构建大鼠胸主动脉平滑肌细胞(A7R5)稳定转染Bmal1的细胞系,实时定量PCR和细胞爬片Bmal1的免疫荧光染色的方法判断所构建细胞系是否稳定过表达Bmal1,细胞爬片Ki67的免疫荧光染色的方法观察时钟基因Bmal1的过表达对血管平滑肌细胞增殖的影响.结果:实时定量PCR结果显示稳定转染Bmal1组细胞Bmal1的表达是对照组的11.2倍(P＜0.01);细胞爬片的免疫荧光染色结果显示稳定转染Bmal1组细胞BMAL1的表达明显升高(P＜0.05),且稳定转染Bmal1组Ki67阳性细胞比例明显升高(P＜0.05).结论:通过慢病毒转染的方法成功构建了血管平滑肌细胞稳定转染Bmal1的细胞系,细胞片Ki67的免疫荧光染色结果显示Bmal1的过表达促进了血管平滑肌细胞的增殖.
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