miR-143-3p靶向LASP1抑制胃癌细胞侵袭和迁移的研究

背景 肿瘤远处转移作为影响胃癌患者预后的一大危险因素,常导致治疗失败.因此,亟需探索针对肿瘤转移的新治疗靶点以改善胃癌患者的预后.目的 探讨通过生物信息学筛选的miRNA能否通过靶向LASP1抑制胃癌细胞的侵袭和迁移.方法 通过生物信息学方法预测靶向于LASP1的miRNAs,基于TCGA数据库分析miRNAs在胃癌中的表达水平及LASP1与miRNAs的相关性.利用双荧光素酶报告实验验证miR-143-3p与LASP1之间的靶向互作关系.以胃癌MGC-803细胞系为实验对象,分别转染miR-143-3p模拟物、抑制剂及其阴性对照,据此将实验分为miR-143-3p模拟物对照组(miR-143-3p mimic NC)、miR-143-3p模拟物组(miR-143-3p mimic)、miR-143-3p抑制剂对照组(miR-143-3p inhibitor NC)和miR-143-3p抑制剂组(miR-143-3p inhibitor).应用Transwell侵袭实验和划痕愈合实验测定各组MGC-803细胞侵袭和迁移能力的变化.qRT-PCR检测转染后MGC-803细胞中LASP1的mRNA表达水平,Western blot检测MGC-803细胞中LASP1的蛋白表达水平.结果 生物信息学分析提示miR-143-3p可能靶向于LASP1,二者相关性r=-0.284(P<0.01).双荧光素酶报告实验进一步证实LASP1是miR-143-3p的一个直接靶基因(P<0.01).Transwell侵袭实验和划痕愈合实验证实miR-143-3p对胃癌MGC-803细胞的侵袭和迁移能力有明显抑制作用.qRT-PCR实验结果显示miR-143-3p mimic组的LASP1的表达水平低于miR-143-3p mimic NC组(P<0.01),而miR-143-3p inhibitor组的LASP1的表达水平高于miR-143-3p inhibitor NC组(P<0.05).此外,Western blot与qRT-PCR的实验结果一致.结论 miR-143-3p可通过靶向下调LASP1,抑制胃癌细胞的侵袭和迁移.